第八百八十六章 杨光（上） (第2/2页)
　　
　　杨光心里越想越是气，手上动作却没有停下。
　　
　　他取乌骨藤干燥药材50千克，粉碎，那种狠劲，看得周围的人已经杨光在弄什么不共戴天的仇人一般。
　　
　　然后，他分别用百分之70乙醇8倍、6倍量回流提取2次，每次2小时，合并2次提取液，减压浓缩至浸膏，加水溶解。
　　
　　再依次用石油醚、乙酸乙酯、水孢和正丁醇萃取3次，合并正丁醇萃取液，减压回收正丁醇并浓缩得浸膏392克。
　　
　　再之后，他取了正丁醇萃取后的浸膏114克，经硅胶柱层析色谱分离，依次以氯仿-甲醇溶剂系统梯度洗脱，分段接收共得到26个流分。
　　
　　其中流分2再经硅胶柱层析色谱分离分别以石油醚-乙酸乙酯溶剂系统梯度洗脱，收集体积比为100∶6和100∶18洗脱部分。
　　
　　流分4再经硅胶柱层析色谱分离，分别以氯仿-乙酸乙酯溶剂系统梯度洗脱。
　　
　　收集体积比为100∶2和100∶15洗脱部分，其中体积比为100∶2的洗脱部分在氯仿中反复重结晶得化合物164mg。
　　
　　体积比为100∶15洗脱部分再经SephadexLH-20凝胶柱色谱分离，收集氯仿-甲醇混合溶剂（1∶2）洗脱部分。
　　
　　取上述3个洗脱部分，经TLC检识，成分有所交叉，故将三者合并，甲醇超声溶解，备用。
　　
　　等上述做完了之后。
　　
　　杨光看了一眼结果，说道：“大家谨慎一些，宁愿做慢一些，也不要因为我们想要赶进度而报废了。”
　　
　　“好的。”
　　
　　“好的，杨科长，没有问题。”
　　
　　虽然近七八年的结果近在眼前，众人还是强迫自己冷静下来。
　　
　　然后进入半制备液相色谱分离。
　　
　　取了上述溶液，用0.45μm微孔滤膜滤过，注入半制备液相色谱仪。
　　
　　“色谱条件为色谱柱∶PhenomenexKromasilCs（250mm×10mmi.d.，5μm）。”
　　
　　“流动相∶甲醇-水98∶2，VV。”
　　
　　“进样浓度∶5gL。进样量∶600μL，流速∶4mLmin。”
　　
　　“柱温∶25℃。检测波长∶210nm。”
　　
　　研究员们一个个把手中的仪器数据报备道。
　　
　　“根据色谱峰出峰时间接受流分，分离得到化合物Ⅱ23.6mg、化合物Ⅲ30.1mg和化合物Ⅳ27.1mg，纯度96%。”
　　
　　杨光看了一眼，说道。
　　
　　“接下来是样品结构的测试。”
　　
　　“取上述4种化合物分别进行核磁共振谱（NMR）、质谱（MS）、红外（IR）光谱的测试。”
　　
　　NMR测试条件∶化合物I、Ⅱ、Ⅳ以CDCl，为溶剂，化合物Ⅲ以C，D，N为溶剂，TMS为内标。
　　
　　IR测试条件为：KBr压片。
　　
　　HRMS测试条件：离子源为API-ES，正离子或负离子方式检测，夫溶剂化气为N。
　　
　　低分辨ESI-MS测试条件。离子源为ESI，正离子和负离子方式检测，去溶剂化气为He。
　　
　　“争取在今天我们就要有一个结果，不论多晚！”杨光大声地吼道。